我来告诉你卵清蛋白ELISA的提取操作是怎样的
更新时间:2021-03-08 | 点击率:613
卵清蛋白ELISA又称白蛋白,是一种含有微量磷的糖蛋白,是一种高质量的蛋白质,占总蛋白的54-69%,是一种典型的球蛋白。不会被5%饱和硫酸铵溶液沉淀。在动物组织、体液和某些植物种子中。分子量低,易溶于水。
卵清蛋白ELISA是动物卵中的一种储存蛋白,它为胚胎发育提供营养氨基酸。某些植物种子的贮藏蛋白是种子萌发的来源,也是食品中蛋白质的重要来源。
提取操作步骤:
1,取新鲜鸡蛋两只,得蛋清50ml,置于烧杯中放置在25-30的水中,不断搅拌条件下,缓慢加入等体积得-丙酮(1:2V/V),立即出现大量白色絮状沉淀,加完后终PH约3.5,继续搅拌30min,然后在4冰箱中放置过夜。
2,次日用漏斗抽滤,得黄绿色清液。
3,边搅拌边加入4预冷的丙酮200ml沉淀卵清蛋白ELISA,在4放置2h之后将上清液小心倒入瓶中回收,下部沉淀部分于4000rpm离心5min,收集沉淀。
4,将沉淀溶于10ml无离子水中,对无离子水(50倍)透析4h,换水两次,再对碳酸钠缓冲液透析过夜,4000rpm离心10min,去除不溶物。